Идентификация клеточной линии и банка клеток
Идентификация клеточной линии и банка клеток является нормативным требованием. Клеточные линии и банки клеток, используемые в препаратах антител, белковых препаратах и продуктах клеточной терапии, должны гарантировать их качество, чистоту и безопасность. Правильная идентификация клеточной линии и банка клеток имеет решающее значение в производстве биофармацевтических препаратов.
Методы идентификации клеточных линий и банков клеток
Идентификация клеточных линий и банков клеток в первую очередь нацелена на главные банки клеток (MCB) и рабочие банки клеток (WCB). Кроме того, банки исследовательских клеток (RCB) обычно проходят проверку на микобактерии и стерильность перед включением в состав объектов GMP для производства MCB. Производители также могут запросить специальное тестирование на вирусы.
В соответствии с действующими правилами (например, ICH Q5A/Q5B/Q5D), идентификация клеточных линий и банков клеток в основном включает в себя следующие аспекты: идентификация клеток, тестирование на стерильность, тестирование на микоплазму, тестирование на эндогенное и экзогенное вирусное загрязнение и тестирование на онкогенность. Элементы и методы тестирования, предоставленные HyQure Biotech, описаны ниже:
|
Тестирование предметов |
Методы обнаружения |
|
|
Идентификация ячейки |
Изозимы, CO1, STR, идентификация видов |
|
|
Бактериальное и грибковое исследование |
Мембранная фильтрация, прямая инокуляция и метод дыхательных сигналов. |
|
|
Тест на микоплазму |
Метод прямого культивирования, метод культуры индикаторных клеток, метод кПЦР (для тестирования микоплазмы и спироплазмы) |
|
|
Тест на микобактерии |
Культуральный метод, метод qPCR |
|
|
Тестирование экзогенных и эндогенных вирусных агентов |
Наблюдение за морфологией клеток и адсорбция крови |
Наблюдение за морфологией клеточной культуры и тест на адсорбцию крови |
|
Посев in vitro различных индикаторных клеток |
Исследование цитопатического эффекта |
|
|
Инокуляция in vivo эмбриональных яиц животных и кур. |
Яйца с эмбрионами кур, молочные и взрослые мыши и т. д. |
|
|
Ретровирусный тест |
Тест на инфекционность, электронная микроскопия, активность обратной транскриптазы (TEM-PERT) |
|
|
Видоспецифическое-тестирование на вирусы |
Мышиное-производное, человеческое-производное, обезьянье-происходящее |
|
|
Тестирование на бычий вирус |
Исследование цитопатического эффекта, метод qPCR |
|
|
Тестирование на вирус свиней |
Исследование цитопатического эффекта, метод qPCR |
|
|
Другие специфические тесты на вирусы |
Тест на парвовирус мышей и т. д. |
|
|
Исследование онкогенности |
Эксперименты на животных |
|