В соответствии с изданием Китайской фармакопеи 2025 года, часть III, общая глава 0234 «Приготовление и контроль качества субстратов клеток животных для производства биологических продуктов» и USP.<1237>МЕТОДЫ ВИРОЛОГИЧЕСКОГО ИСПЫТАНИЯ. Компания HyQure Biotech может провести внутри-тестирование клеток на наличие посторонних вирусов (метод qPCR).
Этот тест проверяет наличие потенциально инфекционных вирусов исходного вида в клеточных линиях/штаммах, а также экзогенных вирусов, занесенных в результате обработки сырья или обработки. Типы и методы тестирования клеток на вирус должны быть определены после оценки риска, связанного с видом клеток, происхождением ткани, характеристиками клеток, историей создания штамма и историей пассажа, методами культивирования и процессами. Если MCB прошел комплексное тестирование, типы экзогенных вирусов, подлежащих тестированию в WCB, могут в первую очередь включать вирусы, которые могли быть занесены во время перехода от MCB к WCB, тогда как вирусы, присутствующие только до создания библиотеки MCB, не нуждаются в повторном тестировании.
Тестирование вирусных нуклеиновых кислот обеспечивает альтернативный подход к определению вирусной нагрузки и выявлению контаминантов. Нуклеиновые кислоты и белковые антигены являются важными компонентами вирусов, и их обнаруживаемое количество обычно указывает на присутствие вируса. Для вирусов со слабой способностью к репликации в системах тканевых культур нуклеиновая кислота может быть единственным обнаруживаемым вирусным компонентом. Для некоторых вирусов, которые не могут вызвать ответ с помощью типичных конечных анализов, тестирование нуклеиновых кислот в настоящее время является наиболее эффективным методом обнаружения.
HyQure Biotech предоставляет следующие услуги по обнаружению вирусного заражения с помощью qPCR
| Категория |
Клеточные линии/Культурный процесс |
Метод |
|
Обнаружение ретровирусов |
За исключением клеток, продуцирующих ретровирусы, активность обратной транскриптазы следует измерять во всех случаях. |
Анализ-усиленной обратной транскриптазы продукта |
| Обнаружение видоспецифичных-посторонних вирусов |
Клеточные линии,-мышиные |
Обнаружение вирусов, вызванных мышью-(метод qPCR) |
|
Клеточные линии,-полученные из человека |
Обнаружение вирусов-человеческого происхождения (метод qPCR) |
|
|
Клеточные линии,-полученные от обезьян |
Обнаружение вирусов, полученных от обезьян-(метод qPCR) |
|
|
Клеточные линии,-полученные от насекомых |
Обнаружение вирусов,-насекомых (метод qPCR) |
|
|
Клеточные линии,-полученные из птиц |
Обнаружение птичьего вируса-(метод qPCR) |
|
|
Обнаружение вирусов,-бычьего происхождения |
В клеточной матрице использовался материал, полученный от крупного рогатого скота-в истории его создания или пассажа. |
Обнаружение полиомавируса крупного рогатого скота (метод qPCR) |
|
Обнаружение вирусов-свиного происхождения |
В клеточном матриксе использовался материал,-полученный из свинины, в истории его создания или прохождения. |
Обнаружение вирусов-свиного происхождения (метод qPCR) |
|
Обнаружение других специфических вирусов |
Клетки чувствительны к определенным специфическим вирусам. |
Обнаружение мышиных микровирусов (метод qPCR) |
|
Обнаружение Vesivirus 2117 (метод qPCR) |